湖南中医学院针推系（长沙 410007）
常小荣 严 洁 岳增辉 沈菁 林亚平 易受乡 曹湘平
[摘要]
目的：研究隔药饼灸对高脂血症兔B26-酮-前列腺素B26-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1α)和血栓素B2（TXB2）的影响。初步阐明隔药饼灸用于治疗高脂血症的作用机理。方法：用胆固醇高脂饮食喂养法，建立兔高脂血症模型。运用隔药饼灸进行治疗。采用放射免疫法测定治疗后血浆6-Keto-PGF1α、TXB2。结果；隔药饼灸组6-Keto-PGF1α含量显著高于模型组（P<0.05），TXB2含量明显低于模型组（P<0.05），TXB2/6-Keto-PGF1α比值较模型组显著下降（P<0.01）；隔药饼灸组6-Keto-PGF1α、TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值与直接灸组比较无显著性差异（P>0.05），表明隔药饼灸与直接灸均可升高6-Keto-PGF1α的含量，降低TXB2含量，调节TXB2/6-Keto-PGF1α的比值。且二者作用相似。结论：隔药饼灸和直接灸组均对高脂血症兔血浆6-Keto-PGF1α、TXB2的含量及TXB2/6-Keto-PGF1α的比值具有调节作用，且二者作用相近。隔药饼灸与直接灸对高脂血症兔的主动脉内皮细胞有一定的保护作用。
[关键词] 隔药饼灸 高脂血症 血管内皮细胞 6-Keto-PGF1α 血栓素B2
The Effect on the prostacyclin, thromboxane B2 for the Hyperlipemia of the Blood-lipid of Rabbit through Moxibustion with Medicinal Cake
Hunan college of tradithinal chinese medicine(changsha 410007)
Changxiaorong Yanjie Yuezenghui Shenjing Linyaping yishouxiang Chaoxiangping
[ABSTRACT]
Objective: Through systemetic observation of moxibustion with medicinal cake to the regulated effect of hyperlipemia of the blood-lipid of rabbit, It expounds acting mechanism of this treatment Method :Using high fat diet of cholesterol the model of hyperlipemia is established, moxibustion with medicinal cake is used to treat it. Adopting radio-immunity, cholesterol of prostacyclin(6-Keto-PGF1α), thremboxane B2(TXB2)are determined after treatment. Results: The prostacyclin (6-Keto-PGF1α) of blood plasm in group of moxibustion with medicinal cake is obviously higher than that of model group and difference has obviously remarkable meaning (P<0.05).The content of thromboxane B2(TXB2) of blood plasma of group of moxibustion with medicinal cake is obviously lower than that of model group And the difference between them has remarkable meaning (P<0.05). The ratio of TXB2/6-Keto-PGF1α of group of moxibustion with medicinal cake is obviously lower than that group of model group And the difference with management of statistics has very remarkable meaning (P<0.01). Conclusions: he moxibustion with medicinal cake and direct moxibustion have regulating and treating effect to the content of 6-Keto-PGF1α, TXB2 of hyperlipemia of rabbit plasma and ratio of TXB2/6-Keto-PGF1α. The moxibustion with medicinal cake and direct moxibustion have rather good protective effect to the endothelial cells of hyperlipemia of aorta of the rabbit.
[Key words] moxibustion with medicinal cake, hyperlipemia, vascular endothelial cells, prostacyclin, thromboxane B2.
随着人们生活水平的不断提高，高脂血症在人群中，特别是中老年人群中的发病率不断升高，导致了与之相关的心脑血管发病率的升高。近年来，不少研究表明，血液中的血栓素B2（TXB2）和前列环素（6-Keto-PGF1α）与高脂血症的发生发展有密切关系。本课题组采用传统的艾灸疗法配以穴位、中药，以高脂血症家兔为受试对象，运用放免检测技术研究隔药饼灸对高脂血症兔TXB2、6-Keto-PGF1α含量的影响；为临床合理应用提供实验依据。现报道如下。
1．材料与方法
1.1 动物来源、分组、造模方法
1.1.1 新西兰纯种兔60只，雌雄兼用。
1.1.2 随机分为4组，每组15只，即：空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组。在实验过程中，有5只兔子因腹泻等原因死亡，空白对照组2只，模型组，直接灸组及隔药饼灸组各1只。
1.1.3 高脂血症模型造模方法
采用免疫反应性损伤法，除常规饲养外，每天上午8:00喂造模饲料10g/只，其中：蛋黄粉15%、胆固醇0.5%、猪油5%，其余为普通词料。连续喂3周后，减去胆固醇，再喂3周。除空白对照组外，其余三组于实验的第六天耳缘静脉注射牛清蛋白（BSA）（沃德赛斯生物公司产品）250mg/kg体重。
1.2 穴位定位与施灸方法
1.2.1 穴位定位：
选穴：Ⅰ组：巨阙、天枢（双）、丰隆（双）共5穴
Ⅱ组：心俞（双）、肝俞（双）、脾俞（双）、共6穴
取穴定位：参照《现代中兽医学大全》[1]及拟人比照法。每组穴位连续施灸10天后进行交换。连续治疗40天。
1.2.2 施灸方法：
艾炷：选用苏州东方艾绒厂生产的东方一型“神灸300”艾炷。
药饼制作药物：丹参、山楂、郁金、大黄、泽泻各等份碎成粉未用醋调匀，制成直径1cm，厚2～3mm，重2.5g的圆型薄饼。
灸法操作：
直接灸组的兔子，于造模的第一天同时施加灸法治疗，直接将艾炷（艾炷下有垫盘）放在穴位上，点燃施灸，待艾炷燃完且余热散尽后，再换另一壮，每穴每天连续灸4壮（约30分钟），每日一次，连续治疗40天。隔药饼灸组的兔子，穴位敷上药饼后，将艾炷的垫盘除去，再将艾炷放在药饼上施灸，余操作同直接灸。
1.3 检测指标及方法
6-酮-前列腺素F1α放免药盒（6-Keto-PGF1αRIA kit），血栓素B2放免药盒（TXB2RIAKit）。（由解放军总医院科技开发公司放免所提供）。
20%乌拉坦4ml/kg耳缘静脉注射，麻醉后取颈动脉血4ml，以抗凝剂与血1:9的比例加入消炎痛-EDTA•Na2（PGF1α试剂盒专用），上、下缓慢颠倒3次。4℃离心（300rpm）10min，取血浆0.5ml放入10ml玻璃试管内，加入1mol/L50μl的盐酸，3ml乙酸乙酯，振荡摇匀，再300rpm离心15min取上清液放入干净的青霉素瓶内，开口斜放（45º）电扇吹干后，盖好并以塑料胶布封好，-20℃冰箱保存。采用非平衡法检测。
1.4 统计方法
所有数据均用SPSS10.10软件进行处理，组间比较若方差齐时选择LSD法，方差不齐时选择Tamhane法进行方差分析和两两比较。
2．结果与分析
表1 隔药饼灸对高脂血症兔血浆6-酮-前列腺素（6-Keto-PGF1α）和血栓素B2（TXB2）含量的影响
组别 n 6-Keto-PGF1α TXB2 TXB2/6-Keto-PGF1α
空白组 13 1047.57±407.60 280.21±103.47 0.30±0.17
模型组 14 676.61±364.87* 464.51±122.70* 0.84±0.38**
直接灸组 14 1161.73±398.91△ 311.27±118.26△ 0.32±0.17△△
隔药灸组 14 1214.35±407.14△ 270.06±124.23△ 0.24±0.14△△
*与空白组比P<0.05 **P<0.01 △与模型组比P<0.05，△△P<0.01
直方图1 隔药饼灸对高脂血症兔血浆PGI2含量的影响
图2 隔药饼灸对高脂血症兔血浆TXA2含量的影响
直方图3 隔药饼灸对高脂血症兔血浆TXB2/6-Keto-PGF1α比值的影响
表1及直方图1、2、3显示：隔药饼灸组6-Keto-PGF1α含量显著高于模型组（P<0.05），TXB2含量明显低于模型组（P<0.05），TXB2/6-Keto-PGF1α比值较模型组显著下降（P<0.01）；隔药饼灸组6-Keto-PGF1α、TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α比值与空白组相近（P>0.05）；与直接灸组比较无显著性差异（P>0.05），表明隔药饼灸与直接灸均可升高6-Keto-PGF1α的含量，降低TXB2含量及TXB2/6-Keto-PGF1α的比值，且二者作用相似。
3．分析
TXB2是一种强有力的血小板聚集和血管收缩物质，能促进血液高凝状态和血栓形成，它与血小板上的TXB2受体结合能抑制腺苷酸环化酶的活性，使血小板内的CAMP活性降低，从而促进血小板粘附、聚集和释反应，具有促血栓形成的作用[2、3]。
6-Keto-PGF1α是由血管内皮细胞合成分泌的舒张血管物质，是强烈的血小板聚集抑制剂，抑制血小板形态变化、释放及粘附反应，从而具有抑制血小板聚集的作用[4、5]。正常情况下，TXB2/6-Keto-PGF1α在体内保持一定的动态平衡，共同维护血液内环境稳定，保持正常血小板功能，维持血管张力及血流畅通，保护血管内皮细胞免受损伤具有重要意义[6]。
高脂血症是动脉粥样硬化形成的主要因素，在血管内壁粥样硬化斑块部位，6-Keto-PGF1α合成减少，且不能完全释放到循环血液中，而内皮细胞源性TXB2合成增加[7]。同时高脂血症可引起内皮细胞损伤，血小板活性增强，导致脂质过氧生物（LPO）生成增加。过氧化脂质既能减少血管壁合成6-Keto-PGF1α，又可增加TXB2产生，使TXB2/6-Keto-PGF1α比值增高，进而形成动脉粥样硬化。
本实验研究结果表明：模型组血浆TXB2的含量升高，6-Keto-PGF1α的含量降低，TXB2/6-Keto-PGF1α的比值升高，并与空白组、直接灸组、隔药灸组的两两比较，都具有统计学意义，这与黄文曾[8]、蔡海江[9]的报道一致，说明本实验的高脂血症兔模型的造模是较成功的。隔药饼灸和直接灸法治疗高脂血症兔模型血浆的TXB2、6-Keto-PGF1α的含量及TXB2/6-Keto-PGF1α的比值与空白对照组两两比较，无统计学差异，说明隔药饼灸直接灸法对高脂血症兔血浆TXB2、6-Keto-PGF1α具有较好的调节作用，维持了血管内皮细胞TXB2、6-Keto-PGF1α的分泌功能。对高脂血症兔模型具有较好的治疗作用。其作用机制是通过调控血液中“T-P系统”来防治高脂血症，从而达到减低高脂血症发生的危险性。直接灸组与隔药灸组血浆TXB2、6-Keto-PGF1α的含量及TXB2/6-Keto-PGF1α的比值，统计学处理无差异，说明直接灸法与隔药饼灸法对高脂血症兔模型的治疗作用近似。
参考文献：
[1] 周吕. 胃肠生理学——基础与临床，北京：科学出版社，1991，208-209
[2] 褚田明，李明，陈国平，等. 脑康防治动脉粥样硬化的实验研究. 上海中医药杂志，1999;(6):44-45
[3] Broun A, Wong NC. Hormonal regulation of apoipoprotion AI. J Mol endocrinol, 1999;22:103
[4] 陈汉斌，许家里，江洪，等. 刺五加对冠心病患者的血浆血栓素B2和6-酮-前列腺素F1α的影响.中国煤炭工业医学杂志，2003;(2):172-173
[5] Russell P paula. New views on the velationship of plasma lipids to cardiovascular disease. Circulation, 1997,95-1347
[6] 刘文豹，贾美枝，刘样，等. 血浆血栓素、前列环素在冠心病、急性心肌梗死中的应用，标记免疫分析与临床，2002;9(2):115-114
[7] 叶平. 血脂的基础与临床.北京：人民军医出版社，第1版：15-19
[8] 黄文增，张步廷，王晓君，等.当归对高血压病患者血浆血栓素及前列环素水平的影响，临床心血管病杂志，1999；15（2）：70-71
[9] 蔡海江.动脉粥样硬化基与临床.南京：江苏科学技术出版社，1996:141