东贵荣1 东红升2 白妍1 金春玉1 李丽秋1
（1、黑龙江中医药大学针灸研究所， 哈尔滨 150040 ；
2、上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海 200437 ）
[内容提要] 目的：从神经细胞电生理学角度探讨头穴针刺急性脑出血大鼠神经元细胞电活动的双向调节作用和机制。方法：采用自身动脉血注入法复制大鼠尾状核急性脑出血模型,应用微电极大脑神经细胞放电技术，对脑出血头穴针刺前后的甩尾反射潜伏期和痛反应神经元放电变化的双向影响进行观察。结果：急性脑出血大鼠痛反应神经元的电活动在注血早期即受到抑制，并随时间的推移而逐渐加重。显示痛反应神经元的痛兴奋性神经元和痛抑制性神经元甩尾反射潜伏期均延长，同时二者机能作用均受损而减弱。头穴针刺使甩尾反射潜伏期均缩短，同时神经元功能恢复而达到新的平衡。结论：头穴针刺对脑出血痛反应神经元细胞的放电活动具有双向的良性调整作用。
关键词 ：头穴透刺 脑出血 神经元放电 双响调节
The Bidirectional Adjustment of Scalp Acupuncture to Neuron Electric-activity of Rat with Acute Cerebral Hemorrhage
DONG Guirong1 , BAI Yan1 ， JIN Chunyu1，DONG Hongsheng2，LI Liqiu1
( 1 Institute of Acupuncture and Moxibustion of Heilongjiang University of TCM, Harbin 150040
2Yueyang Hospital of Shanghai University of TCM , Shanghai 200437;）
Abstract Objective: to clarify the function and mechanism of bidirectional adjustment of scalp acupuncture to neuron electric-activity of rat with acute cerebral hemorrhage by nerve cell electro-physiology. Methods: To prepare the Wistar rat model with acute cerebral hemorrhage by the method of injecting self-arterial blood into the caudate nucleus, then observe the effect of scalp acupuncture to latency of tail-flick and electric discharging of pain-reflection neuron by microelectrode technology. Results: The result showed that the electric-activity of neuron was inhibited just in the early period of injecting blood and the inhibition would be more with the time went on.The latency of tail-flick of pain-excitation neuron and pain-inhibition neuron of pain-reflection neuron was prolong and at the same time the function of both were bring down.The latency of tail-flick of prolongation was shortened by scalp acupuncture and the function of the neuron was recovered upto new balance.Conclusion: The electric-activity of pain-reflection neuron of rat with acute cerebral hemorrhage by scalp acupuncture could be adjusted bidirectly and went better.
Key words: Scalp acupuncture
Bidirectional adjustment
Acute cerebral hemorrhage of experiment
Nerve electro-physiology
针刺的双向调节作用是指当人体机能处于失衡状态时，针刺某些腧穴，则机体失衡的机能可向正常的状态转化而趋于平衡[1]。神经元电活动是直接反映中枢脑神经系统功能状态的重要指标。急性脑出血后，神经元的电活动受到影响，功能受到抑制。头穴针刺治疗急性脑出血疗效显著，大量临床观察和实验研究均已证明头穴针刺具有明显的神经元保护作用[2-6]。本实验采用微电极大脑神经细胞放电技术，进行了脑出血头穴针刺前后甩尾反射潜伏期和神经元放电变化的双向影响的研究，以求从神经细胞电生理学角度探讨头穴针刺的双向调节作用和机制。
1 材料与方法
1.1 动物及分组
雄性Wistar大鼠（225～250g）40只，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。PEN部分按随机数字法分为4组：正常组（n=8），盐水组（n=8），注血组（n=8），针刺组（n=8）。PIN部分也按随机数字法分为4组：正常组（n=2），盐水组（n=2），注血组（n=2），针刺组（n=2）。
1.2 模型制备
采用腹腔注射20%氨基甲酸乙酯（1g/kg）麻醉。尾核出血模型采用自身左心室动脉全血注入法，注血量30微升。此方法为本课题组自1998年起进行脑出血动物实验研究的造模法，操作简便，成功率高，造模成功的行为学标志是：用手提起动物尾部使其后肢离开地面时，动物以瘫侧前肢为中心原地划圈。核团定位按Pellegrino图谱，尾核A（1.0～1.8）；L（2.6～3.4）；H（5.0～7.0）束旁核A：（-2.2～-2.6）；L（1.0～1.4）；Ｈ（5.5～6.5）。于注血后即刻电针百会透太阳穴。电麻仪为G-6805型，正极接百会，负极接太阳。选参数为1v，15Hz，通电时间为10分钟。盐水组注入等量的0.9%的生理盐水，其余步骤同注血组。
1.3 检测方法
采用辐射热照尾诱发放电的方法,聚集直径为1cm，控制甩尾反射潜伏期在4～8.30秒之间。选择痛反应神经元为观察对象，辐射热照尾开始和甩尾反射发生停止照射时皆用电刺激器使用单脉冲记号作标记，与痛兴奋神经元(PEN)和痛抑制神经元(PIN)的放电情况同时显示在VC-9示波器上，同时用GF-777双道录音机记录，最后经Power-lab chart4.0医用数据处理软件转换成放电频率图，通过频率图上的数值计算出潜伏期、抑制时程和净增值后进行分析。
1． 4统计学处理
实验结果采用SPSS10.0统计软件中t检验进行统计分析。
2 结果
2.1 针刺对大鼠不同状态下甩尾潜伏期（TFL）的影响
2.1.1 针刺对正常大鼠TFL的影响，结果见表1。
表 1 针刺对正常大鼠TFL（单位：S） 影响的比较（X+SD）
时间窗（分钟） 正常组（8只） 针刺组（8只）
针刺前10－0 5.16±0.15 5.15±0.13
电针10分钟
针刺后0－3 5.15±0.12 7.65±0.15▲▲
针刺后4－6 5.18±0.17 7.32±0.16▲▲
针刺后7－9 5.20±0.14 6.85±0.20▲▲
针刺组与正常组比较 ▲ P<0.05 ▲▲ P<0.01
2.1.2 针刺对脑出血大鼠TFL的影响，结果见表2。
表 2 针刺对脑出血大鼠TFL（单位：S） 影响的比较（ ±SD）
时间窗（分钟） 正常组（8只） 针刺组（8只）
注血前10－0 5.60±0.13 5.61±0.18
注血后0－10 5.75±0.19 电针10分钟
注血后11－20 6.05±0.17** 5.69±0.12▲▲
注血后21－30 6.34±0.17** 5.86±0.13*▲▲
各组与注血前比较 * P<0.05 ** P<0.01
针刺组与注血组比较 ▲ P<0.05 ▲▲ P<0.01
由表1、2可见，头穴针刺对正常状态下大鼠的TFL具有抑制作用（P<0.01）。而当注血使大鼠甩尾反射受到抑制，TFL明显延长时（P<0.01），头穴针刺可以使受抑制的甩尾反射恢复，并使延长的TFL缩短（P<0.01），即针刺能减轻注血对大鼠TFL的影响，且即刻效应显著。
2.2 针刺对急性脑出血大鼠左尾核（血肿局部）痛反应神经元放电的影响（见表3-4）
表 3 各组大鼠不同时间窗左尾核PEN放电比较（ ±SD）
时间窗 指标 例数 正常组 盐水组 注血组 针刺组
注血（水）前 潜伏期（S） 8 4.73±0.16 4.71±0.19 4.79±0.14 4.75±0.20
30－21分钟 净增值
（Hz） 9.90±1.16 9.70±1.30 9.24±1.29 9.87±1.27
注血（水）前 潜伏期（S） 8 4.80±0.19 4.92±0.22 4.83±0.23 电针10分钟
20－11分钟 净增值（Hz） 9.40±1.34 8.78±1.37 9.17±0.90
注血（水）前 潜伏期（S） 8 4.79±0.14 5.21±0.20 4.65±0.23 5.67±0.16**
10－0分钟 净增值（Hz） 9.24±1.29 8.40±1.97 8.91±0.92 6.95±1.35**
注血（水）后 潜伏期（S） 8 4.85±0.16 5.12±0.22 5.16±0.23* 电针10分钟
0－10分钟 净增值（Hz） 9.10±1.46 8.51±1.94 5.21±0.90**
注血（水）后 潜伏期（S） 8 4.87±0.19 5.07±0.14 6.21±0.19** 5.27±0.36*▲▲
11－20分钟 净增值（Hz） 8.46±0.97 8.92±1.94 1.77±0.55** 6.95±1.35**▲▲
注血（水）后 潜伏期（S） 8 4.87±0.19 5.07±0.14 7.03±0.17** 6.31±0.24**▲▲
21－30分钟 净增值（Hz） 8.46±0.97 8.92±1.94 0.30±0.21** 2.15±1.02**▲▲
各组与施加处理因素前比较 * P<0.05 ** P<0.01
针刺组与注血组比较 ▲ P<0.05 ▲▲ P<0.01